USB的全稱是Universal Serial Bus，USB支持熱插拔，即插即用的優點，所以USB接口已經成為MP3的最主要的接口方式。USB有兩個規范，即USB 1.1和USB 2.0。

USB 1.1是目前較為普遍的USB規范，其高速方式的傳輸速率為12Mbps，低速方式的傳輸速率為1.5Mbps（b是bit的意思），1MB/s（兆字節/秒）=8Mbps（兆位/秒），12Mbps=1.5MB/s。

USB 2.0規范是由USB 1.1規范演變而來的。它的傳輸速率達到了480Mbps，折算為MB為60MB/s，足以滿足大多數外設的速率要求。USB 2.0中的“增強主機控制器接口”（EHCI）定義了一個與USB 1.1相兼容的架構。它可以用USB 2.0的驅動程序驅動USB 1.1設備。也就是說，所有支持USB 1.1的設備都可以直接在USB 2.0的接口上使用而不必擔心兼容性問題，而且像USB 線、插頭等等附件也都可以直接使用。

USB 2.0標準進一步將接口速度提高到480Mbps，更大幅度降低了MP3音樂文件的傳輸時間。